无菌操作的演示:
凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面
靠近酒精灯火焰操作。
器皿使用前过火灭菌
继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。 各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。
吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。
器械的清洗和消毒
玻璃器械洗消:
一、新的玻璃器皿的洗消:
自来水刷洗,除去灰尘。
烘干、泡盐酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。
刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干。
泡酸、清洗:用清洁液(重铬酸钾120g:浓硫酸200ml:蒸馏水1000ml)浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。
烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。 高压消毒:包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。
高压消毒后烘干
二、旧的玻璃器皿的洗消:
刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。
泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。
烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。" "
公司已合作单位有贵阳医学院、重庆师范大学、福建医科大学、山东中医药大学、长春中医药大学、河南中医学院、昆明医科大学、宁夏医科大学、湖北中医药大学、广西中医药大学、内蒙古医科大学、徐州医学院、福建中医药大学、泸州医学院、广东医学院、江西中医药大学、广东药学院、新乡医学院、辽宁医学院、遵义医学院、潍坊医学院、泰山医学院、滨州医学院、皖南医学院、甘肃中医学院、蚌埠医学院、陕西中医学院、济宁医学院、贵阳中医学院、桂林医学院、承德医学院、牡丹江医学院、赣南医学院、长治医学院、齐齐哈尔医学院、西安医学院、河北中医学院、成都医学院、吉林医药学院、首都医科大学附属北京天坛医院、首都医科大学宣武医院、浙江大学医学院附属第二医院、首都医科大学附属北京儿童医院、广州医科大学附属医院、中山大学孙逸仙纪念医院、南京大学医学院附属鼓楼医院、天津医科大学附属肿瘤医院、中山大学中山眼科中心、天津医科大学总医院、中山大学附属第三医院、苏州大学附属医院、上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心、武汉大学人民医院、北京医院、吉林大学医院、山东省立医院、第四军医大学唐都医院、首都医科大学附属北京朝阳医院、上海市胸科医院、中国医学科学院血液学研究所、重庆医科大学附属医院、北京大学肿瘤医院、浙江大学医学院附属儿童医院、上海交通大学医学院附属人民医院、西安交通大学医学院附属医院、第三军医大学新桥医院、上海市精神卫生中心、中国医学科学院整形外科医院、北京积水潭医院、山东省肿瘤医院、沈阳军区总医院、北京大学第六医院、中日友好医院、哈尔滨医科大学附属第二医院、东方肝胆外科医院、上海市儿童医院、中国医学科学院皮肤病医院、重庆医科大学附属第二医院" "
公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学来源细胞系及原代细胞,全程提供细胞系背景、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养的技术支持,让您实验再无烦扰!
公司由在国外工作和学习多年的留学人员创办,由国内中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,复旦大学等多名工作在线的细胞培养,提供细胞培养技术支持。
公司依靠自身一些世界的技术和理念,以世界的技术支撑阵容,提供一系列细胞相关的技术服务。为中国的生命科学事业赶超欧美,提供了重要的基石。
公司将依靠自主研究开发的高技术和有的价格竞争力的产品,立足国内,面向世界。力争打破国外大公司在细胞培养科学领域接近垄断的地位,为中国在生命科学的这一领域一席之地。
公司筹划未来三年内,在沈阳、济南、北京、西安、宁夏、武汉、重庆等国内代表城市建立细胞培养分实验室,以便更好的服务国内广大医院、大学、制药企业等,你们的每一份关心和支持,都是我们前进的动力!
目前,跟公司签订长期战略合作伙伴的科研单位有山西中医学院、福建医科大学附属第二医院、上海市第六人民医院、北京大学医学部、四平中心医院、广州中医药大学、中科院上海生命科学研究院生化与细胞研究所、解放军第306医院、江南大学、西南医院、吉首大学、西南大学化学化工学院、宁波大学、福建医科大学附属医院、中南大学、延安大学附属医院、中国科学院上海药物研究所、天津市儿童医院、江苏省中医药研究院、湘雅医学院、第四军医大学预防系劳动与环境教研室、扬州大学、上海交通大学、中国医科大学、浙江省立同德医院、中国人民解放军第150中心医院、苏州大学、四川大学华西医院、云南大学、扬州大学兽医学院、上海交通大学医学院附属第九人民医院、海南医学院、江苏肿瘤医院、上海市闵行区中心医院、大连医科大学附属医院、中国科学院广州生物医药与健康研究院、沈阳药科大学、广州市第八人民医院、南京大学、浙江中医药大学、兰州大学、上海中医药大学、中国农业科学院饲料研究所、厦门市妇幼保健院、重庆大学、南京军区总医院、天津市人民医院、北京医学科学肿瘤医院、江苏大学、桂林医学院附属医院、中国科学院化学研究所" "
培养细胞的冻存及复苏:
细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
1. 冻存细胞
(1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液。
(2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清。
(3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外。
(4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液。
(5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记。
(6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。
操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。
2.复苏细胞
(1)从罐中取出冻存管。
(2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其融化,30~60s内完成。
(3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液。
(4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次。
(5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。
冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。" "
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公司提供部分ATCC细胞有(限于页面篇幅,公司全部细胞并未展示,如有具体所需细胞,请咨询我们哦┈技┈术(订购)┈热┈线:0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7┈微┈信┈同┈号)┈联┈系┈Q┈Q:3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0);CRL-2065|MLTC-1细胞;CRL-1442|BRL-3A细胞;CCL-61|CHO-K1细胞;CCL-81|Vero细胞;CRL-1651|COS-7细胞;CCL-34|MDCK细胞;CRL-1772|C2C12细胞;CRL-2300|RLE-6TN细胞;CCL-10|BHK-21细胞;CRL-1650|COS-1细胞;CRL-1570|NRK-49F细胞;CRL-6509|NRK细胞;CRL-1571|NRK-52E细胞;CCL-223|CMT93细胞;CCL-82.1|GH3细胞;CRL-1811|A9细胞;CCL-94|CRFK细胞;CRL-10762|CTLA4 Ig-24细胞;CCL-70|CV-1细胞;CCL-44|EBTr(NBL-4)细胞;CRL-1688|FRhK-4细胞;CRL-1600|H4-II-E-C3细胞;CRL-1446|H9c2(2-1)细胞;CCL-22|MDBK(NBL-1)细胞;CCL-64|Mv.1.Lu(NBL-7)细胞;CRL-2192|NR8383细胞;CRL-1840|OK细胞;TIB-18|P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞;CRL-1580|P3X63Ag8.653细胞;CRL-1657|R1610细胞;CRL-1780|RF/6A细胞;CRL-2765|RSC96细胞;CCL-88|Tb 1 Lu细胞;HB-95|W6/32细胞;CRL-1751|WEHI 164细胞;CRL-1702|WEHI 231细胞;CRL-2057|RIN-m细胞;CRL-2947|RenCa细胞;CRL-1503|STO细胞;CCL-37|RK-13细胞;CCL-33|PK-15细胞;CRL-1711|SF-9细胞;CRL-1405|104C1细胞;TIB-67|J774A.1细胞;CRL-2872|EPC细胞;CRL-2181|SVEC4-10细胞;" "
CRL-6322 B16-F0贴壁性细胞株,公司提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养的技术支持,让您实验再无烦扰!
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