产品介绍:
产品名称:辛夷探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称:Flos magnoliae
产品货号:LZ-P2868
规格:50T
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光。
有效期:一年
实验步骤:
一.辛夷探针法PCR样品制备
1.PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测,上样量3-5ul。PCR产物为10ng/nl左右为佳。上海
2.PCR产物与变性buffer混合。在干净的PCR管底部加入5ul SSCP上样缓冲液(变性缓冲液,同《分子克隆》中的测序缓冲液),然后在缓冲液中央加入PCR扩增产物。按照经验,扩增效果在琼脂糖胶上能看出比较亮的带的样品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就适当增加1.5、2或3不等,同时加大上样缓冲液的量,比如加3ul的PCR产物,缓冲液加到8ul变性效果更好。
3.PCR产物变性。加好的样品进行离心,使样品集中在管底。PCR仪上95℃变性10分钟,立即取出PCR产物连同架子一同置于冰上静置5min,以免变性的产物复性。
如何进行 PCR 实验?
一、准备实验材料(1)DNA模板:包含你想要复制的DNA区域。(2)引物:短的单链DNA片段,用于指导DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一种酶,用于合成DNA。(4)四种脱氧核苷酸(dNTPs):DNA的构建块。(5)缓冲液:提供适宜的反应环境。(6)镁离子或其它必需的离子:通常作为DNA聚合酶的辅助因子。 二、设定反应混合物将所有材料混合在微量离心管中。混合物的总体积通常在20-50微升之间。
3. PCR程序(1)将混合物放入PCR机(热循环仪)中,并设定程序。PCR程序通常包括以下阶段:辛夷探针法试剂盒(2)初次变性:加热至94-98°C,持续几分钟,使DNA双链解开成单链。(3)循环步骤(通常进行30-40次循环):(4)变性阶段:加热至94-98°C,持续20-30秒,使DNA双链解开。(5)退火阶段:降温至50-65°C,持续20-40秒,允许引物与模板DNA结合。(6)延伸阶段:加热至72°C,持续1分钟每1千个碱基,以便DNA聚合酶合成新的DNA链。(7)后延伸:在72°C下持续5-10分钟,确保所有可用的DNA模板都被复制。(8)保持阶段:将温度降至4-15°C,直到用户准备取出样品。
小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)PCR检测试剂盒 , FAM172A ELISA Kit
大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA检测试剂盒RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit
人DNA损伤诱导转录因子4样蛋白(DDIT4/P801)试剂盒 Human DDIT4 ELISA kit
英文名称MouseBonemorphogeneticproteieceptorIIELISAKit小鼠骨成型蛋白质受体II(BMPRII)
冰冻切片结缔组织(CONNECTIVETISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色试剂盒50次
Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAPCR检测试剂盒大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)PCR检测试剂盒
人抗核抗体(ANA)ELISA
小鼠甲状腺素(T4)试剂盒 Mouse thyroxine,T4 ELISA Kit
异质性胞核核糖核蛋白H(hNP H)PCR检测试剂盒 , hNP H ELISA Kit
Mouseacetylcholine,ACHPCR检测试剂盒小鼠乙酰胆碱(ACH)PCR检测试剂盒
ELISAKitD1R小鼠多巴胺D1受体规格:48T/96T
human3-hydroxy-3-glaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)PCR检测试剂盒
辛夷探针法PCR鉴定试剂盒AFU(Mouse alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 小鼠αL岩藻糖苷酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CD73/FITC 荧光素标记胞浆-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPH2 白喉酰胺生物合成样蛋白2抗体 规格 0.2ml
CMV 巨细胞病毒 IgM(间接法二步法)
phospho-MST1R(Tyr1353) 英文名称: 0酸化原癌基因c-Met相关酪酸激酶抗体 0.1ml
ALS2CR4 英文名称: 肌侧索硬化症相关蛋白4抗体 0.2ml
Anti-CD73/FITC 荧光素标记胞浆-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
PCR实验的基本步骤:
DNA聚合酶是实验室中常用的生物学酶之一,在PCR实验中具有重要的作用。实验室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus细菌产生的一种DNA聚合酶,在分子生物学研究中得到广泛应用。Taq聚合酶具有热稳定性,可以在高温条件下保持活性,这是由于其来源于热液生物,能够存活和正常活动于高温环境。这使得Taq聚合酶在聚合酶链式反应(PCR)中起到关键的作用。Taq聚合酶能够按照DNA模板合成新的DNA链,因此在PCR中用于扩增目标DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,导致其生成的PCR产物末端容易出现额外的腺嘌呤碱基。因此,在某些应用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus细菌产生的一种DNA聚合酶。与Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的热稳定性和耐酶性。这使得Pfu聚合酶在高温PCR反应中表现出色,其高度稳定的酶活性能够确保PCR反应的可靠性和准确性。此外,Pfu聚合酶还具有3'-5'外切酶活性,可以修复并纠正PCR反应中的腺嘌呤碱基误配,有效防止误差累积。因此,Pfu聚合酶适用于需要高度准确的PCR扩增和DNA测序。
三、Tth聚合酶:
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8细菌产生的一种DNA聚合酶。与Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有热活性反转转录酶活性,可以将RNA模板合成相应的DNA链。因此,Tth聚合酶在逆转录PCR(RT-PCR)中得到广泛应用,用于将RNA转录成DNA,并通过增加热活性酶来实现PCR扩增。此外,Tth聚合酶还具有一定的外切酶活性,可用于修复和校正PCR产物的末端。