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RD培养基,培养基 |
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RD培养基(用于毕赤酵母)
货号:LZ-PYJ4850
英文名称:Regeneration Dextrose Medium
产品规格:2×500mL|10×500mL
保存:2~8℃
RD系列产品组成:
产品说明:
再生培养基(Regeneration Dextrose Medium)即RD培养基,是一种液体培养基,用于毕赤酵母感受态细胞原生质体的再生和利用营养缺陷型筛选毕赤酵母阳性转化子。适用的毕赤酵母菌株有gS115、KM71等。RD培养基中加入2%纯化琼脂即为RD琼脂培养基(RD Agar)。RD培养基中加入1%琼脂即为RD上层琼脂(RD Top Agar);加入L-组氨酸即为RDH培养基;同时加入L-组氨酸和2%纯化琼脂即为RDH琼脂培养基(RDH Agar);
配制过程中的常见问题分析:
01 培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
02 培养基不凝固或凝固性差
(1)颗粒培养基称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)培养基加热过度
(5)琼脂量不足
03 培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
注意事项:
1)培养基尽量使用新鲜培养基,2~4h内用完;
2)上海应使用预还原培养基,预还原24~48h更好;
3)可采用预还原灭菌法制作的培养基(用前于培养基中加入还原剂,如L-半胱氨酸、维生素C等,尽可能使预还原剂处于还原状态);
4)液体培养基应煮沸10min,以驱除溶解氧,并迅速冷却,立即接种医。学教育网搜集整理;
5)厌氧菌的培养基均应营养丰富,并加有还原剂与生长刺激因子(血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等)。
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